公開(公告)號
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CN1978661A
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公開(公告)日
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2007.06.13
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申請(專利)號
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CN200610130404.8
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申請日期
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2006.12.19
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專利名稱
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一種快速從天然產(chǎn)物中篩選具有抗腫瘤活性物質的方法
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主分類號
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C12Q1/48(2006.01)I
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分類號
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C12Q1/48(2006.01)I;C12N9/12(2006.01)I;G01N21/31(2006.01)I;A61K36/02(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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天津商學院
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發(fā)明(設計)人
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王雪青;趙 培;胡蓓娟;胡 萍;龐廣昌;黃丹虹;郭曉雪
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地址
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300134天津市北辰區(qū)津霸公路東口
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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天津市三利專利商標代理有限公司
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代理人
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肖莉麗
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國省代碼
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天津;12
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主權項
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一種快速從天然產(chǎn)物中篩選具有抗腫瘤活性物質的方法,其特征在于,包括下述步驟: 步驟一:將來自天然產(chǎn)物胞內或胞外的有機溶劑萃取物或水相提取物過濾,收集粒徑小于0.22μ的濾液,作為待測樣品; 步驟二:將待測樣品、蛋白濃度為1.3-1.7mg/ml的酪氨酸激酶、酪氨酸激酶活力試劑盒底物、酪氨酸激酶活力試劑盒的緩沖液按照體積比為1∶1∶1∶1的比例混合,制成待檢測樣品反應試劑混合物,再按照酪氨酸激酶試劑盒的常規(guī)方法進行操作,至酶反應結束,用酶標儀迅速讀取該反應試劑混合物的吸光度值;同時將與待測樣品相同的有機溶劑或除鹽海水、與待測樣品相同蛋白濃度的酪氨酸激酶、酪氨酸激酶活力試劑盒底物、酪氨酸激酶活力試劑盒的緩沖液按照體積比為1∶1∶1∶1的比例混合,制成溶劑對照混合物,再按照酪氨酸激酶試劑盒的常規(guī)方法進行操作,至酶反應結束,再與待檢測樣品反應試劑混合物相同波長的條件下用酶標儀迅速讀取該溶劑對照混合物的吸光度值,將待檢測樣品反應試劑混合物的吸光度值與溶劑對照混合物的吸光度值進行計算比較,從而判斷是否存在抗腫瘤活性的物質。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種快速從天然產(chǎn)物中篩選具有抗腫瘤活性物質的方法,旨在提供一種適用于抗腫瘤活性物質初期篩選和活性跟蹤檢測的需要,效率高、費用低的篩選方法。將胞內或胞外的萃取物或水相提取物過濾,收集粒徑小于0.22μ的濾液,作為待測樣品;將待測樣品、酪氨酸激酶、酪氨酸激酶活力試劑盒底物、酪氨酸激酶活力試劑盒的緩沖液混合,按照試劑盒的常規(guī)方法進行操作,至酶反應結束,讀取其吸光度值;將與待測樣品相同的有機溶劑或除鹽海水、酪氨酸激酶、酪氨酸激酶活力試劑盒底物、酪氨酸激酶活力試劑盒的緩沖液混合,采用相同的方法處理后讀取其吸光度值,將兩個吸光度值進行計算比較,判斷是否存在抗腫瘤活性的物質。
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國際公布
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