方法名稱(chēng)： |
雌二醇—雌二醇的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定雌二醇（C18H24O2)的含量。 本方法適用于雌二醇的含量測(cè)定。 |
方法原理： |
取本品適量，加甲醇溶解并稀釋制成溶液，量取該溶液加內(nèi)標(biāo)后流動(dòng)相稀釋?zhuān)⑷胍合嗌V儀，在205nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，記錄色譜圖。另取對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。 |
試劑： |
1. 甲醇 2. 乙腈 |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2. 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：乙腈＋水=55 45 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：205nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取雌二醇對(duì)照品適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.50mg的溶液，搖勻，為對(duì)照品溶液。 2. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制 精密稱(chēng)取對(duì)羥基苯甲酸乙酯適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.75mg的溶液，搖勻，為內(nèi)標(biāo)溶液。 3. 供試品溶液的制備 取本品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.50mg的溶液，搖勻，為供試品溶液。 注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
精密量取供試品溶液10mL與內(nèi)標(biāo)液5mL，置200mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。精密量取20μL注入高效液相色譜儀，于205nm波長(zhǎng)處測(cè)定雌二醇的吸收值，另精密量取對(duì)照品溶液10mL同上處理，測(cè)定。計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.829-830。 |
