氫化可的松的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定氫化可的松的含量。

本方法適用氫化可的松。

供試品和內標均制成甲醇溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處檢測氫化可的松（C₂₁H₃₀O₅)和內標炔諾酮的吸收值，計算出其含量。

甲醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按氫化可的松峰計算應不低于 2000。氫化可的松峰與內標物質峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：水 甲醇= 30 70

2.2 檢測波長：240nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品適量，精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取氫化可的松對照品適量，加甲醇溶解并稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液。

3. 內標溶液的制備

取炔諾酮適量，加稀甲醇制成每1mL中約含有0.40mg的溶液，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加稀甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述供試品溶液與內標溶液5mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，混合均勻，取10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處測定氫化可的松和內標炔諾酮的吸收值，按內標法以峰面積計算，即得。氫化可的松對照品溶液，同法測定。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.402。