咪康唑氯倍他索乳膏—硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定咪康唑氯倍他索乳膏中硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的含量。

本方法適用咪康唑氯倍他索乳膏。

將供試品內(nèi)精密加入內(nèi)標(biāo)溶液，經(jīng)水浴攪拌溶解，于冰水中冷卻使基質(zhì)凝固，濾過，再向基質(zhì)中加甲醇，濾液置于50mL量瓶中并加甲醇稀釋至刻度，冷凍2小時以上，快速過濾后，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處檢測硝酸咪康唑（C₁₈H₁₄Cl₄N₂O·HNO₃)和丙酸氯倍他索（C₂₅H₃₂ClFO₅)和內(nèi)標(biāo)鄰苯二酸二丁酯的吸收值，計算出其含量。

1.甲醇

2.乙腈

3. 0.5%醋酸銨

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按咪康唑氯倍他索峰計算應(yīng)不低于 2000。硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索峰與內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.5%醋酸銨 乙腈 甲醇= 24 38 38

2.2 檢測波長：240nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品2.5g，精密稱定。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取丙酸氯倍他索對照品12.5mg，置20mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為丙酸氯倍他索對照品溶液；

精密稱取硝酸咪康唑?qū)φ掌?0mg，置50mL量瓶中，精密加入丙酸氯倍他索對照品溶液2mL與內(nèi)標(biāo)溶液1mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取鄰苯二酸二丁酯0.4mL，加甲醇稀釋至100mL，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品置燒杯中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1mL，加甲醇20mL，置80℃水浴加熱攪拌使溶解，在冰水中冷卻，待基質(zhì)凝固后，濾過，于基質(zhì)中再加甲醇15mL、10mL重復(fù)提取二次，合并三次濾液在同一50mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，置水浴中冷卻2小時以上，取出后迅速過濾，放至室溫，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液的續(xù)濾液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長240nm處測定硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索及內(nèi)標(biāo)鄰苯二酸二丁酯的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積分別計算硝酸咪康唑和丙酸氯倍他索的含量，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p394。