尼爾雌醇原料藥－尼爾雌醇－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定尼爾雌醇原料藥中尼爾雌醇的含量。

本方法適用于尼爾雌醇原料藥。

供試品經(jīng)甲醇溶解并稀釋，再取適量加流動相稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長221nm處檢測尼爾雌醇的峰面積，計算出其含量。

甲醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按尼爾雌醇峰計算應(yīng)不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=80 20

2.2 檢測波長：221nm

2.3 柱溫：室溫

1.對照品溶液的制備

精密稱取尼爾雌醇對照品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg溶液，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長221nm處測定尼爾雌醇（C₂₅H₃₂O₃)的峰面積，計算出其含量。