我們在前期試驗中將增強型綠色熒光蛋白(EGFP)基因與真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒pcDNA3.1(+)–EGFP,鞘內(nèi)直接注射將重組質(zhì)粒注入大鼠的蛛網(wǎng)膜下腔,綠色熒光顯示新構(gòu)建的質(zhì)粒雖未整合入神經(jīng)元細(xì)胞,但被蛛網(wǎng)膜下腔上皮細(xì)胞攝取并表達(dá)。隨后又將前腦啡肽原(PENK)基因與真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)連接,鞘內(nèi)直接注射將重組質(zhì)粒注入坐骨神經(jīng)慢性壓迫模型大鼠的蛛網(wǎng)膜下腔,產(chǎn)生較好和較長時間的鎮(zhèn)痛效果。為了進(jìn)一步研究前腦啡肽基因在體內(nèi)被體細(xì)胞攝取表達(dá)的部位。
本實驗將人前腦啡肽基因(PENK)連接到綠色熒光載體(pEGFPC3)上,構(gòu)建pEGFPC3PENK載體,為后續(xù)疼痛基因治療的體內(nèi)外實驗奠定了分子生物學(xué)基礎(chǔ)。
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