血細(xì)胞分析在儀器處于正常工作狀態(tài)下, 血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性取決于樣品的質(zhì)量�，F(xiàn)就血細(xì)胞分析樣品質(zhì)量的控制談幾點(diǎn)個(gè)人經(jīng)驗(yàn)。
1．樣品采集中的控制點(diǎn)
1．1 靜脈血樣品, 不應(yīng)在輸液、輸血同側(cè)肢體上采血。要防止血標(biāo)本的溶血, 特別是在血液注入容器中不能垂直射入,而應(yīng)沿試管壁流入,以免產(chǎn)生大量氣泡而造成標(biāo)本溶血。采血完畢, 使血液立即與國(guó)家醫(yī)學(xué)網(wǎng)EDTA·2K2抗凝劑混勻, 即將盛血容器輕輕來(lái)回顛倒8次進(jìn)行初始混勻。目的是抑制血小板的聚集,防止血小板發(fā)生不可逆性的聚集而使血液凝固;皮膚血樣品(曾稱為毛細(xì)血管血),其采血的整個(gè)操作過(guò)程中動(dòng)作要迅速。血液從針刺部位自然流出最佳,混有組織液的第1 滴血棄去。血液流出不暢, 切勿用力擠壓, 以免造成組織液混入。血入一次性容器(下稱子彈頭),血液應(yīng)立即與EDTA·2K2結(jié)晶抗凝劑進(jìn)行初始混勻, 即將盛血容器先甩三次,然后子彈頭朝上,用手指輕輕彈擊尖部側(cè)面三次,再將子彈頭向下甩三次。用同樣彈擊、甩的方式和次數(shù),再顛倒二遍混勻。
1．2 血液采集后的其它非顛倒混勻方式,如隨便震搖、旋轉(zhuǎn)、彈擊和點(diǎn)敲(子彈頭)數(shù)次,被抑制聚集的血小板解離不充分,會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)呈假性升高和降低, 或血液與抗凝劑混勻不充分易發(fā)生血液凝固;不能圖省事, 直接從剛采集到的未抗凝的靜脈血從其容器中轉(zhuǎn)移到做血細(xì)胞分析的抗凝容器里,否則易造成肉眼看不見(jiàn)的血凝塊,而影響血細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
1．3 皮膚血樣品的盛血容器, 子彈頭容量為1.5mL的最佳。筆者實(shí)驗(yàn)證實(shí),使用0.5mL的子彈頭,樣品采集后及時(shí)檢測(cè),所有的白細(xì)胞和血小板檢測(cè)結(jié)果均呈假性升高和降低;若放置10 min后測(cè)定,其結(jié)果與1.5 mL容量的子彈頭立即檢測(cè)無(wú)差異顯著性。其原因可能為在容量小的容器中被抑制聚集的血小板因時(shí)效短不容易均勻地分布在容器中,故用1.5 mL容量的子彈頭為宜。
2 樣品分析中的控制點(diǎn)
2.1 正確采集血液是獲得準(zhǔn)確、可靠實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要一環(huán),而樣品進(jìn)入儀器分析,則是實(shí)驗(yàn)室的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。因此,實(shí)驗(yàn)室的操作者必須是專業(yè)素質(zhì)高、負(fù)責(zé)任的技術(shù)人員。
2.2 樣品進(jìn)入儀器分析前, 應(yīng)對(duì)樣品再次混勻。目的是使可逆性聚集的血小板團(tuán)分散成單個(gè)血小板,使其它血細(xì)胞分布均勻。樣品再次混勻方式:靜脈血,將盛血容器夾在兩手掌心來(lái)回搓動(dòng)8 次,用同樣方式和搓動(dòng)次數(shù),將容器顛倒二遍搓動(dòng);皮膚血再次混勻同初始混勻方式。
2.3 靜脈血樣品及時(shí)或不能及時(shí)上機(jī)分析均應(yīng)再次混勻。皮膚血樣品及時(shí)分析只要初始混勻即可上機(jī)分析,如不能及時(shí)檢測(cè),當(dāng)樣品要分析時(shí),應(yīng)再次按初始混勻方式混勻樣品。
3 樣品分析后的控制點(diǎn)
3.1 樣品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,一眼就能識(shí)別的不合格血樣就被拒收。但那些肉眼察覺(jué)不到的有核紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、血小板的“聚集”等影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的血樣,可通過(guò)樣品分析后,從直方圖(以下直方圖的文字描述, 為庫(kù)爾特Ac T diff2 血細(xì)胞分析儀的圖像特征)和測(cè)定數(shù)據(jù)旁的警告符號(hào)*來(lái)判斷分析樣品的質(zhì)量。
3.2 因采血不順利, 或采血后未立即進(jìn)行初始混勻,易發(fā)生血小板不可逆性的微凝聚集, 如血細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定結(jié)果與臨床明顯不符,應(yīng)重新采集血樣;由血小板可逆性聚集所致,白細(xì)胞直方圖在三個(gè)峰前出現(xiàn)小峰(左邊曲線與縱坐標(biāo)相交),血小板直方圖無(wú)電子擬合線,儀器有警告提示。通常情況下,當(dāng)混勻樣品時(shí),沒(méi)有充分將可逆性聚集的血小板團(tuán)分散成單個(gè)血小板,儀器將那些未分散的血小板團(tuán)誤認(rèn)為小白細(xì)胞而計(jì)入白細(xì)胞數(shù)中;在血小板計(jì)數(shù)時(shí),若團(tuán)塊大于儀器預(yù)設(shè)的脈沖值,將不被儀器計(jì)入,或幾個(gè)血小板當(dāng)一個(gè)計(jì)入,致使影響白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。但紅細(xì)胞計(jì)數(shù),血紅蛋白測(cè)定不受影響。遇此情況,可將樣品放置10 min后重新混勻樣品再測(cè),若直方圖正常,警告符號(hào)消失,可發(fā)出報(bào)告單,如仍呈現(xiàn)異常直方圖,并伴有警告*提示,應(yīng)考慮其它原因所致,如溶血標(biāo)本,因紅細(xì)胞碎片大小不一,血小板直方圖擬合線形成階梯狀
,造成血小板計(jì)數(shù)呈假性升高。重采血樣分析,或用手工法復(fù)檢。
3.3 由血小板可逆性聚集所致,呈現(xiàn)的假性白細(xì)胞計(jì)數(shù)增加和血小板假性減少,其它原因所致的結(jié)果異常,應(yīng)引起操作者的足夠重視,不要因樣品的質(zhì)量或人為的誤差而誤導(dǎo)臨床診斷和治療。
總之,正確的樣品采集、混勻是控制血細(xì)胞分析樣品質(zhì)量的關(guān)鍵,借助直方圖和儀器旗標(biāo)的提示,對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品是否可靠起著重要的監(jiān)控作用。
