全血細胞培養(yǎng)染色體技術常用試劑配制

　　10．RNA酶A（Sigma)

　　（1)儲備液

　　稱取RNA酶A 1g溶于100ml醋酸鈉中，置沸水中煮10min，分裝后儲于-20℃。

　�。�2)工作液

　　用儲備液按1：100稀釋。

　　11．20×SSC

　　NaCl　　　　　　　　　　　 175g

　　檸檬酸三鈉 　　　　　　　　88g

　　dH₂O 　　　　　　　　　　1000ml

　　固定試劑溶解后，dH₂O定容至1000ml，調pH至7.4，高壓滅菌。

　　12．雜交液（高深度，HMmix)

　　去離子甲酰胺　　　　　　　　　 6.0ml

　　100×Denhardt’s液　　　　　　1.0ml

　　50%硫酸葡聚糖　　　　　　　　 2.0ml

　　1%人或鮭精DNA^※

　　20×SSC

　　※：臨用前加入，終濃度為100～200μg/ml。

　　該液為高濃度雜交液， 存于4℃。

　　13．PBT液

　　BSA　　　　　　　　　 　　5%

　　Triston X-100/(PBS)　　 0.1%

　　注：BSA液用前應用Whatman 3mm濾紙過濾。

　　14．兔抗生物素（α-生物素)單克隆抗體

　　用PBT液1：100稀釋。

　　該單抗現(xiàn)可從英國Dako公司購得。

　　15．金（10～20nm)標羊抗兔二抗

　　用PBT液1：50稀釋。

　　16．銀溶液（Janesen)

　　17.Hoedst 33258（Sigma)

　　儲備液（100×)

　　Hoedst染料　　　　　　　　　　 5mg

　　甲醇　　　　　　　　　　　　　 10ml

　　工作液：用2×SSC 1：100稀釋儲備液。

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